1材料与办法1.1取材部位狗挠骨，大小35mmX 20%中性福尔马林液内固定1~2d流水冲洗1~2h1.2包埋剂的制备1号试剂：甲基丙稀酸甲脂400ml邻苯二甲酸二丁酯100ml二甲苯500ml2号试剂：甲基丙稀酸甲酯800ml，邻苯二甲酸二丁酯200ml 3号试剂：甲基丙稀酸甲酯800ml过氧化苯甲酰20g邻苯二甲二丁酯200mL4号试剂：甲基丙稀酸甲酯800ml过氧化苯甲酰60g邻苯二甲酸二丁酯200ml.（过氧化苯甲酰需在37°C烘箱内枯燥24h前方可使用，3号、4号试剂配制完结后储存于4C冰箱中）1.3脱水与包埋1.3.1骨组织浸入70%，80%，90%，正丁醇，无水乙醇1 11，二甲苯111，各2h 1.3.2浸入1号，2号，3号包埋剂内各2~ 1.3.3将枯燥后的样品置于小玻璃瓶中（小玻璃瓶容量大小一般为样本的3~5倍）1.3.4用铅笔书写标签纸，并用透明胶带粘于玻璃瓶体上。

　　1.3.5将玻璃瓶放入抽真空泵内（一0.64个大气压）抽1~ 1.3.6小玻璃瓶加盖，并穿入7号针头2个（排气），在放入抽真空泵继续抽1h放入37C烘箱内1d完全凝固后，将玻璃瓶置于一30 C冰箱15min取出用布包瓶，敲碎玻璃瓶，取出包埋块，并即时标志。

　　1.4切片的制作对包埋块适当修整，使其能固定于切片机上。切片厚度10Pm1.5游离片染色1.5.1切片的准备切片浸入0. 1%甲酸10min自来水10次/min：20010328批改日期：2001 0725作者单位：第四军医大学西京医院全军骨科钻研所，西安710032 1.5.2染液的制备A液：固绿FCF 3.75g蒸馏水500mW水醋酸6mlB液：天青1 1.5g蒸馏水250ml.C液：碱性品红5g将A、B、C液混合，搅拌，溶解后过滤，60C枯燥，制成骨染色粉。使用前用70%乙醇100ml加骨染色粉0. 1.5.3骨粉染色液内10min蒸馏水洗3次，无水乙醇3次/2min中性树胶封固2结果3领会3.1影响因素（1）温度：高温可引起爆聚，包埋块变脆。（2）必需充分抽真空，如抽真空不彻底，组织块内残留大量气泡，影响切片质量，甚至形成切片完全失败。（3）漂片水温过高塑料易溶解，水温过低塑料及组织不宜展平。（4）染色工夫的长短决定染色的深浅。（5）过氧化苯酰的量应依据温度上下而定，一般为20 3.2毛病（1）周期长，从固定、脱水、浸塑、切片约需2周。（2）包埋液在聚合时易产生气泡。（3）切片不易摊平。（4）由于脱片不宜做组化和杂交方面的染色，只实用于做游离染色。